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牛凝固血基因组DNA提取方法的比较及优化
作者: 刘莉莉 [1,2] ; 王雅春 [1] ; 赵萌 [2] ; 张旭 [1] ; 吴宏军 [3] ; 刘爱荣 [4] ; 王东升 [3] ; 俞英 [1] ; 徐青 [2]
关键词: 凝固血 基因组DNA 匀浆 DNA提取试剂盒 酚-氯仿法 牛
摘要:为筛选出一种从牛凝固血中高效获得基因组DNA的方法,本研究选择64个凝固血样,分别进行匀浆破碎和手动剪碎的预处理,结合酚一氯仿抽提和试剂盒提取方法,提取基因组DNA,并选择抗凝血作为参照,对试验耗时、DNA数量和质量进行比较。结果表明:通过对牛凝血块进行匀浆破碎预处理,不仅缩短了蛋白酶K的消化时间,而且获得了高质量基因组DNA,浓度和纯度均达到抗凝血提取效果(P〉0.05)。酚-氯仿提取法相比试剂盒法,虽然得到更多量的DNA,但是DNA质量下降,而且试验耗时增加。本研究证实,匀浆破碎预处理后的牛凝固血样可以作为高质量基因组DNA的样本来源,并可替代抗凝血,解决生产中抗凝血不易获得和采集的问题。
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