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利用体内外成熟卵母细胞生产转TLR4基因抗病克隆绵羊的研究
作者: 徐静 [1] ; 卓志勇 [1] ; 邓守龙 [1] ; 张运海 [2] ; 刘国世 [1] ; 连正兴 [1] ; 张金龙 [3]
关键词: 超数排卵 IVM 转基因克隆 TLR4 绵羊
摘要：研究旨在提高羊的抗病性能、生产培育高抗病力的转基因羊。本实验分别利用绵羊超数排卵获得的体内卵母细胞和体外成熟培养的卵母细胞作为核受体进行转基因克隆羊的生产。体内超排共获卵2431枚，其中可用卵77．29％（1879／2431）：体外成熟培养共获卵3292枚，其中可用卵70．90％（2334／3292）。体内外核移植实验分别获得体内重构胚1879枚、体外重构胚1786枚。结果表明：体内核移植重构胚融合率（81．12％）显著性高于体外核移植重构胚（68．88％）（P〈0．05）：将部分体内、外重构胚以手术法分别移植于89只及72只受体，体内重构胚移植妊娠率为10．11％．显著高于体外重构胚移植妊娠率（2．78％）。体内、外重构胚移植后各产羔1只，PCR检测均为转TLR4阳性。本实验初步建立了一套较有效的体内外核移植生产转基因克隆羊的方法，并比较了不同来源卵母细胞对核移植效率的影响．发现体内超数排卵所获取的成熟卵母细胞数量、质量均优于体外成熟培养获卵。