- · 他把化学残留挡在餐桌之外[01/11]
- · 中国畜牧兽医学会十四届八次常务理事(扩大)会议在京召开[12/30]
- · 2020羊业发展高级研讨会在天津召开[12/02]
- · 热烈祝贺《畜牧学名词》正式公布并出版发行——畜牧学科基础建设的重大成就[12/02]
- · 中国畜牧兽医学会"科技大讲堂"战疫保供献真知[12/02]
- · 优质肉鸡高质量发展研讨会在宁都顺利召开[11/24]
- · 中国畜牧兽医学会助力第八届象山白鹅节成功举办[11/19]
- · 茵你而来 超你所想 开启独"1"无二免疫新时代——2020经典猪瘟防控与净化高峰论坛在京顺利召开[11/05]
猪新基因FAM134B的克隆及稳定干扰肌内前体脂肪细胞阳性克隆的筛选
作者: 袁章琴 [1] ; 任阳 [1] ; 汪以真 [1]
关键词: FAM134B基因 小干扰RNA 质粒转染 稳定筛选肌内前体脂肪细胞 猪
摘要:本实验旨在对猪新基因肼M134B基因进行全长克隆,尝试有效沉默FAM134B基因的干扰表达载体的构建和筛选.并筛选出沉默似M134B基因的稳定阳性细胞。设计合成3对嬲M134B基因的特异性发夹siRNA干扰片段,将其克隆入干扰载体pYr—1.1,构建可沉默删M134B基因的siRNA表达载体朋M134B-1、FAM134B-2和FAM134B-3,采用“pofectamineTM(Lip)2000介导质粒转染肌内前体脂肪细胞,通过实时荧光定量分析siRNA表达载体的干扰效果,并进一步用G418进行了稳定转染siRNA的肌内前体脂肪细胞筛选。结果表明:肼M134B基因的全长克隆成功,其siRNA表达载体构建正确,通过稳定筛选后,干扰效率较高的朋M134B-3表达载体和稳定转染硝M134B-3的细胞为构建筛选成功的siRNA表达载体和阳性细胞,干扰效率达65.0%。本研究成功克隆了新基因FAM134B的全长以及构建了有效沉默朋朋,34B基因表达的干扰载体,并筛选出了稳定沉默的阳性肌内前体脂肪细胞,为进一步研究础M134B基因在脂肪沉积中的功能研究奠定了基础。
上一篇:原产地与异地保存条件下豁眼鹅生产性能、屠宰性能和肉品质的比较研究
下一篇:鸭HDAC1基因编码区的分子克隆及生物信息分析