不同培养体系对绵羊颗粒细胞增殖及CYP19基因mRNA表达的影响

摘要：为建立更完善的绵羊颗粒细胞体外培养体系，比较不同培养体系下颗粒细胞的增殖与细胞中CYP19基因mRNA的表达水平。绵羊颗粒细胞培养体系分为4个组，即1组（DMEM／F12）、2组（DMEM／F12＋10％FBS）、3组（DMEM／F12＋10％FBS＋Insulin-Transferrin-Selenium-X（ITS））和4组（DMEM／F12＋ITS）。结果表明：当绵羊颗粒细胞培养体系中没有血清时（1组和4组），ITS的存在可显著提高CYPl9基因mRNA的相对表达量（P〈0．05），显著高于有血清培养体系（2组和3组）（P〈0．05）；随着培养时间的延长，2、3组CYP19基因mRNA的相对表达量明显降低（P〈0．01）。结果提示．绵羊颗粒细胞体外培养时，培养基中的血清会显著降低CYP19基因mRNA的表达，在无血清培养体系中增加ITS添加剂则会增加并保持CYP19基因mRNA的表达水平。因此，在进行绵羊颗粒细胞体外功能研究时．采用无血清的培养基，并在其中添加一定量的胰岛素、转铁蛋白制剂是必要的。