基于AKP、OCT-4染色技术的新生牛精原干细胞多能性的确定

作者: 郑鹏 [1] ; 于娜 [1] ; 田亚光 [1] ; 黄贺 [1] ; 张贵学 [1]

关键词: OCT-4 鉴定精原干细胞体外培养牛

摘要：用AKP、OCT-4染色技术鉴定精原干细胞的多能性，以期为牛精原干细胞的深入研究奠定基础。将新生牛睾丸解离成单细胞悬液，差速贴壁法纯化精原干细胞，并用RT-PCR和免疫组化的方法鉴定分离的细胞；分离后的精原干细胞进行体外培养，形成集落后转移到支持细胞饲养层上继续培养，形成集落后进行AKP、OCT-4染色鉴定多能性。结果表明：分离纯化后的精原干细胞表达精原干细胞的标志基因PGP9．5，不表达GDNF的受体基因GFRal，精原干细胞的AKP、OCT-4染色呈阳性；精原干细胞体外培养可形成葡萄串状细胞集落和类ES细胞集落．葡萄串状细胞集落转移到支持细胞饲养层上能在GDNF培养液中增殖，类ES细胞集落转移到支持细胞饲养层上能在LIF培养液中增殖，细胞集落AKP、OCT-4染色呈阳性。

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基于AKP、OCT-4染色技术的新生牛精原干细胞多能性的确定

作者: 郑鹏 [1] ; 于娜 [1] ; 田亚光 [1] ; 黄贺 [1] ; 张贵学 [1]

关键词: OCT-4 鉴定 精原干细胞 体外培养 牛

关键词: OCT-4 鉴定精原干细胞体外培养牛