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藏绵羊胃溶菌酶基因的克隆、定量分析及其蛋白性质和结构的预测
作者: 朱莲莲 [1] ; 江明锋 [1,2] ; 张鹏 [1] ; 骆美蓉 [1] ; 李建波 [1] ; 任洪辉 [1] ; 王永 [1]
关键词: 溶菌酶 克隆 MRNA表达 藏绵羊
摘要:本实验旨在研究藏绵羊溶茵酶组织基因组成、分布情况和蛋白质结构。通过RT—PCR方法克隆测序得到藏绵羊溶茵酶基因核苷酸序列.并对氨基酸的组成和功能活性位点如53-谷氨酸和71-天冬氨酸等进行统计;运用生物信息学软件对藏绵羊溶菌酶的等电点、信号肽序列等性质进行分析,并构建系统进化树;运用荧光定量PCR方法对藏绵羊的瘤胃、瓣胃、皱胃、肾脏、气管和肝脏分别进行检测溶菌酶基因的部分组织分布情况及其mRNA的表达水平。结果表明:此绵羊溶菌酶基因核苷酸序列为447bp.编码148个氨基酸残基;其mRNA的表达水平在藏绵羊的瘤胃和瓣胃相对较高,与其他4种组织比较差异显著(P〈0.05);皱胃与肾脏也有显著性差异(P〈0.05)。
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