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一种驴和马及狐狸源性成分快速检测方法的研究
作者: 卞如如 范阳阳 刘艳艳 霍胜楠 盛清凯 谭晴晴 张全芳 张卉 步迅 山东省农业科学院生物技术研究中心 山东省农业科学院应用生命科学实验室 山东济南251000 山东省食品药品检验研究院 山东济南250101 山东省农业科学院畜牧兽医研究所 山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室 山东济南250100
关键词: 16S rRNA基因 多重实时荧光PCR法 驴 马 狐狸 源性成分
摘要:实验旨在建立快速检测驴、马和狐狸源性成分的方法。以驴、马和狐狸的线粒体保守序列16S r RNA基因为靶基因,设计通用引物和以不同荧光素标记的特异Taq Man探针,构建与通用引物共用的阳性扩增内标(Internal Amplification Control,IAC)作为PCR监控反应体系。通过优化PCR反应体系和条件,建立能同时检测驴、马和狐狸源性成分的四重实时荧光PCR方法。结果表明:利用驴、马、狐狸、牛、猪、羊、水貂、狗、鸡、鸭、大豆、小麦、玉米等物种检测没有交叉反应,证明该方法特异性高,准确性好。该方法模板DNA检测灵敏度为0.01 ng。本研究建立的驴、马和狐狸源性四重荧光实时PCR检测体系灵敏度高、特异性强,能有效鉴别动物产品中驴、马和狐狸的源性成分,也可用作相关动物皮张真伪的鉴别方法。
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