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BCB和Zebularine对绵羊体细胞核移植胚胎发育效果的影响
作者: 曹慧 李俊杰 郝永兰 刘爱菊 李文瑞 魏巧莉 田树军 孙树春 河北农业大学动物科技学院 河北保定071000 河北省牛羊胚胎工程技术研究中心 河北保定071000
关键词: BCB染色 Zebularine 绵羊 体细胞核移植
摘要:为探究亮甲酚蓝(BCB)染色选择的卵母细胞是否有利于体细胞核移植胚胎的体外发育,本实验将卵丘-卵母细胞复合体(COCs)放入含有BCB的PBS中染色,根据细胞质颜色可将卵母细胞分成BCB+组和BCB-组,并以未经BCB处理的COCs作为对照组,然后将卵母细胞进行体外成熟,统计卵母细胞的成熟率。将成熟后的卵母细胞进行体细胞核移植,其中,部分BCB+组卵母细胞所需的供体细胞利用Zebularine处理,统计体细胞核移植的卵裂率、桑椹胚率和囊胚率。结果表明:BCB+组卵母细胞的成熟率显著高于对照组和BCB-组(71.15%vs 65.38%,53.52%,P〈0.05);BCB+组核移植胚胎的卵裂率(87.91%vs 56.83%)、桑椹胚率(37.41%vs 21.73%)和囊胚率(21.48%vs6.82%)均显著高于BCB-组(P〈0.05);与对照组相比,BCB+组卵裂率(87.91%vs 83.23%)和囊胚率(21.48%vs14.89%)也显著升高(P〈0.05)。BCB+组供体细胞经Zebularine处理后,胚胎发育能力进一步提高,其中囊胚率显著高于BCB+组、对照组和BCB-组(29.25%vs 21.48%,14.89%,6.82%,P〈0.05)。
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