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猪A-FABP基因真核表达载体的构建及其组织表达
作者: 李晓玲 于光辉 崔小荣 张廷荣 孙金海
关键词: 猪 A-FABP基因 真核表达载体 组织表达
摘要:本实验以长白猪背最长肌为实验材料,进行组织RNA的提取及A-FABP基因的克隆,构建pEGFP-N 1-A-FABP真核表达我体,并通过脂质体转染成纤维细胞,48 h观察荧光表达.同时应用荧光定量PCR法检测猪7种不同组织(心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、背最长肌、腿肌)中A-FABP基因的差异表达.结果表明:成功构建pEGFP-N 1-A-FABP融合表达载体,并在细胞中表达绿色荧光蛋白;A-FABP基因在7种组织中均有表达,其中背最长肌和腿肌中A-FABP基因的表达量最高,与其他组织相比差异极显著(P<0.01),而脾脏和肾脏中的表达量相对于心脏、肝脏和肺脏差异显著(P<0.05),而A-FABP基因表达量在心脏、肝脏和肺脏中差异不显著(P>0.05).表明该基因能够在真核载体和细胞中表达,并且在猪不同组织的表达具有差异性.
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