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绵羊VEGF-C基因可变剪切体克隆与序列分析
作者: 张立春 [1] 李梦姝 [2] 曹阳 [1] 孙福亮 [3] 朴庆林 [1] 金海国 [1] 张明新 [1]
关键词: 血管内皮生长因子C 新吉细毛羊 小尾寒羊 基因克隆 可变剪切
摘要:为克隆不同品种绵羊血管内皮生长因子C (VEGF-C)基因,探寻该基因与绵羊毛囊发育及毛用性状形成的内在关系,本实验利用RT-PCR方法从小尾寒羊与新吉细毛羊皮肤组织克隆出VEGF-C基因mRNA并进行生物信息学分析.以皮肤组织cDNA为模板,RT-PCR扩增显示存在多个扩增条带,克隆测序结果发现所有条带均为VEGF-C基因序列.除最长片段为全长VEGF-C基因外,其他均为VEGF-C异构体,片段长度依次为1 318、1 298、1 197、890、732、604 bp.所有异构体均表现为序列中间部位的缺失,分析显示各异构体由不同类型的可变剪切方式组合加工产生.氨基酸分析发现大部分异构体造成移码突变,编码类VEGF-C蛋白小肽,推测可能参与VEGF-C蛋白成熟或功能调节.本研究首次证明VEGF-C基因在绵羊皮肤组织存在复杂的转录后加工过程,为进一步研究VEGF家族在绵羊皮肤组织中的功能奠定基础.
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