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哈萨克羊抑制素α基因原核表达载体的构建及其诱导表达

作者: 解津刚 [1] 热衣扎别克·哈德坎 [2] 张翔宇 [1] 卢奇诚 [1] 李东升 [1] 吾热力哈孜·哈孜汗 [1]

关键词: 哈萨克羊 抑制素α 克隆 原核表达载体 诱导表达

摘要:本实验以新疆哈萨克羊睾丸组织为实验材料,提取组织总RNA,经反转录得到cDNA并以此为模板,用以GenBank (NM_001308579.1)序列为参考设计的特异性引物进行PCR扩增,之后将扩增产物与pET32a(+)载体相连,构建重组质粒pET32a(+)-INHα.将构建好的重组质粒转化到受体菌E.coli BL21中,经IPTG诱导,表达pET32a(+)-INHα重组蛋白.对扩增产物的测序鉴定结果显示INHα基因克隆成功;经过酶切和测序鉴定确定准确构建了pET32a(+)-INHα重组载体;经Tricine-SDS-PAGE电泳鉴定,检测到INHα基因编码区全序列表达的重组蛋白单一条带,这说明原核表达载体构建成功并在原核细胞中正常表达,这为今后绵羊INHα基因的免疫功能研究提供了参考依据.


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