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丙氨酰-谷氨酰胺预处理对氧化应激猪小肠上皮细胞活力和自噬的影响

作者: 辛向荣 贺琴 游金明 叶亚玲 邓宸玺

关键词: 丙氨酰-谷氨酰胺 小肠上皮细胞IPEC-1 氧化应激 细胞活力 自噬

摘要:试验旨在研究预添加丙氨酰-谷氨酰胺(Ala-Gln)对过氧化氢诱导下的小肠上皮细胞IPEC-1的影响.采用单因子试验设计,向IPEC-1细胞培养基中分别添加0、0.25、0.50、1.00、2.00、4.00 mmol/L Ala-Gln,预处理20 h,然后利用400 μmol/L H2O2诱导细胞4h,创建氧化应激模型.试验共设6个处理,每个处理8个重复.结果表明:IPEC-1细胞活力随Ala-Gln预处理水平的提高而提高(P<0.05);且在Ala-Gln预处理水平为2.00 mmol/L时细胞活力达最大值,4.0 mmol/L水平下反而使细胞活力下降(P<0.05),但仍高于0.50、1.00 mmol/L Ala-Gln水平下IPEC-1细胞活力;添加Ala-Gln提高了氧化应激状态IPEC-1谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.05),降低了丙二醛(MDA)含量(P<0.05);细胞SOD活性呈曲线变化,在Ala-Gln预处理水平为0.25、0.50 mmol/L时活性较高,之后随Ala-Gln预处理水平提高而降低(P<0.05);在Ala-Gln预处理水平为1.00 mmol/L时,MDA含量趋于稳定;添加Ala-Gln后,随Ala-Gln水平细胞质中阳性荧光信号不断增强,且在Ala-Gln为1.00、2.00 mmol/L预处理水平下较为明显;4.00 mmol/L Ala-Gln水平下IPEC-1同对照组相比密度显著增加,且结构完整度相似,阳性荧光信号无显著差异,但同2.00 mmol/L Ala-Gln添加水平相比细胞密度和生物膜结构完整度提高,胞内荧光信号有减少趋势.由此可得,预添加Ala-Gln可显著提高氧化应激状态下IPEC-1细胞中GSH-Px、SOD酶活性,显著降低脂质过氧化产物MDA含量,缓解氧化应激;在IPEC-1细胞中预添加Ala-Gln能通过增强细胞自噬用以缓解细胞氧化应激.


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