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奶牛小肠上皮细胞氧化损伤模型的构建
作者: 孔令联 [1] 崔艳军 [1] 杨金勇 [2] 李东平 [1] 刘东鑫 [1] 王翀 [1] 茅慧玲 [1]
关键词: 过氧化氢 奶牛 肠上皮细胞 氧化应激
摘要:本试验旨在构建奶牛小肠上皮细胞氧化损伤模型,为研究氧化应激状态下的肠道养分吸收机制提供平台和基础.采用不同浓度的H2O2(0、50、100、200、400、800 μmol/L)处理奶牛小肠上皮细胞不同时间(2、4、6h),用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,氯化硝基四氮唑蓝(NBT)法测定细胞内活性氧(ROS)含量,比色法测定乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果表明:与对照组相比,200 μmol/L H2O2作用奶牛小肠上皮细胞2h的细胞存活率(64.03%)显著降低(P<0.05),细胞内ROS含量和培养液中LDH活性显著上升(P<0.05),细胞内SOD和GSH-Px活性均显著降低(P<0.05).综上所述,200 μmol/L H2O2作用奶牛小肠上皮细胞2h,可构建奶牛小肠上皮细胞氧化损伤模型.
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