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玻璃化冷冻对猪GV期卵母细胞成熟及发育能力的影响
作者: 周悦 ; 卢俊求 ; 吴亚辉 ; 庞月林 ; 蒋艳 ; 王晓丽
关键词: 玻璃化冷冻 冷冻保护液 半麦管 GMP OPS 猪
摘要:为了获得最适的冷冻猪GV期卵母细胞的冷冻保护液配方和最适冷冻载体,本研究就目前应用最多的7种冷冻保护液配方进行筛选,并且比较3种不同冷冻载体冷冻卵母细胞的效果差异。结果表明:7组冷冻保护液对GV期卵母细胞有低毒性作用,各组分裂率、囊胚率、囊胚细胞数均低于对照组,综合各组指标选取3组对猪MII期卵母细胞的发育能力损伤最小的冷冻保护剂,应用GMP管对其冷冻保护效果进行比较,发现第6组的极体率29.47%,第5组的极体率23.54%与第3组的极体率8.28%相比差异显著(P〈0.05),且第5组的存活率、极体率与第3组相比差异显著(P〈0.05)。综合考虑,选取第5组HM+7.5%(DMSO+EG),HM+15%(DMSO+EG)+0.5 mol/L Su组作为冷冻保护液来比较3种不同冷冻裁体冷冻卵母细胞的效果差异,发现半麦管冻融后的卵母细胞存活率高达54.11%与OPS管、GMP管的33.11%和26.79%差异显著(P〈0.05),半麦管法更适合GV期猪卵母细胞的玻璃化冷冻。