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水牛转录因子 c-Myc 克隆和表达研究
作者: 邓彦飞 ; 石德顺 ; 刘庆友 ; 邓海莹 ; 罗婵 ; 杨素芳
关键词: 转录因子c-Myc iPS细胞 真核表达 水牛
摘要:原癌基因c—Myc是诱导多能干细胞(iPSC)生产中重要的转录因子之一。水牛c—Myc的克隆和表达,可以为下一步研究其功能和使用特异性转录因子生产水牛iPSC奠定基础。采用RT—PCR扩增水牛c—Myc编码区(CDS),RT—PCR和免疫荧光技术检测内源c—Myc在水牛胎儿成纤维细胞(BFF)和胃上皮细胞(BSEC)中的表达情况:构建表达c—Myc的逆转录病毒载体(pMX—c—Myc),病毒法转入BFF中,免疫荧光技术分析外源c—Myc在BFF中的表达情况。结果表明:c—Myc在水牛BFF和BSEC中都有表达;水牛C—Myc的CDS全长1320bp,氨基酸序列与牛、猪、人和鼠相应蛋白的同源性分别为98%、96%、91%和86%,与小鼠c—Myc蛋白的结构相似;逆转录病毒载体介导的C一朋w能在BFF中表达。
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