牦牛TLR7基因的克隆序列分析及其组织表达研究

摘要：为了解牦牛TLR7基因特点及其在牦牛各组织器官动态表达分布规律。根据GenBank中牛TLR7序列设计引物克隆并对所得序列进行生物信息学分析,并以β-actin为参照基因,SYBR Green I为荧光染料,建立检测牦牛天然免疫受体TLRs家族TLR7基因的荧光定量PCR方法,对TLR7基因在牦牛各组织中的表达分布进行研究。结果表明：克隆得到牦牛TLR7基因编码区全长3 153 bp,编码氨基酸1 050个,N端含有27个氨基酸组成的信号肽,分子量120.7192 ku,理论等电点为7.35;TLR7编码蛋白整体表现为亲水性;10条序列当中牦牛与野牦牛、普通牛、绵羊等物种具有较高的同源性,在系统发育树中距离最近,说明TLR7基因序列具有较高的保守性;荧光定量分析发现,TLR7基因在牦牛所有组织中均有表达,TLR7基因在肾脏表达量最高,在大肠表达量最低,在肝、脾、肺、卵巢、小肠、心、胃、肌肉、乳腺等组织依次有较高的表达。该研究结果为理解TLRs在牦牛等其他高原动物体内的分布及动态表达规律以及牦牛抗病毒免疫及育种的相关研究奠定了基础。