新疆塔里木马鹿茸c—myc基区cDNA克隆和bHLHZIP结构分析及表达

摘要：采集6头成年马鹿生长60d茸组织，获得塔里木马鹿茸c—myc基因eDNA全长序列，并比对分析其转录因子的序列特征；结果表明：得到塔里木马鹿茸c—myc基因eDNA1840bp序列，其中ORF区长1314bp，编码438个氨基酸；马鹿茸c—mye序列比对，与牛和羊序列相似性最高分别为96％和97％；氨基酸比对分析，在序列121位处马鹿比牛、羊、猪、人类及鼠少1个天冬氨酸（D）；马鹿茸c—myc基因的DNA结合域由bHLHZIP结构组成，共80个氨基酸残基，在bHLH区的第16和46位氨基酸处，塔里木马鹿分别为天冬氨酸D和精氨酸R，而牛、羊、猪、人和鼠为天冬酰胺N和赖氨酸L。6个DNA结合位点和E—box的结合位点没有氨基酸变异；羊、牛、猪、人、鼠和马鹿的c—myc基因的Zip序列变异较大。本实验通过0．8mmol／LI门G诱导，2h后构建的Pet－28b—c—mye原核表达载体开始表达目的基因，PAGE检测获得约48ku目的蛋白质，同时发现随着诱导时间延长没有发现表达量的变化。