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绵羊痘病毒古浪县分离株H7R基因的克隆及其原核表达
作者: 吴健 [1] ; 朱海霞 [2] ; 赵银龙 [3] ; 吴国华 [2] ; 赵志荀 [2] ; 颜新敏 [2] ; 张强 [2] ; 李影 [1]
关键词: 羊痘病毒 H7R 基因克隆 原核表达
摘要:根据已发表的山羊痘福州株全基因组,以其H7R基因进行引物设计,从古浪株中提取绵羊痘全基因组首次克隆H7R基因。将目的片段插入pMD19-simple载体后使用BamHI+NotI双酶切构建pET-28a-H7R原核表达载体,经测序验证构建载体正确。将重组质粒转化到Rosetta感受态通过IPTG诱导,SDS—PAGE检测,结果表明:在17ku处出现明显条带,经过几次条件优化,H7R在大肠杆菌中主要以包涵体的形式表达。这为后续研究羊痘病毒的入侵及新型疫苗的研究奠定了基础。
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