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超低温冷冻对小鼠桑椹胚多能性因子Oct-4表达的影响
作者: 周光斌 [1,2] ; 郭将 [1] ; 曾艳 [2] ; 程柯仁 [2] ; 傅祥伟 [2] ; 朱士恩 [2]
关键词: OCT-4 超低温冷冻 桑椹胚 昆明白小鼠
摘要:本实验旨在探讨昆明白小鼠桑椹胚超低温冷冻后Oct-4表达的变化与胚胎发育潜力的关系。胚胎采用OPS法冷冻,即胚胎于10%EG+10%DMSO溶液中预处理30s,然后再移入玻璃化溶液(EDFS30)中处理25s,以OPS为承载器投入液氮中。毒性组胚胎未投入液氮,其他过程与冷冻组相同,新鲜胚胎为对照组。胚胎解冻后,检测Oct-4 mRNA与蛋白的表达.通过观察其形态正常率、囊胚发育率和囊胚细胞数来综合判断其体外发育能力。结果表明:冷冻组和毒性组较桑椹胚中Oct-4 mRNA的表达量对照组相比显著降低(P〈0.05),蛋白表达量3组间无显著差异。桑椹胚处理后的形态正常率以及桑椹胚培养48h后的囊胚发育率(96.67%-100%)和囊胚细胞数(89.67~92.33)3组间无显著差异。结果显示,玻璃化冷冻保存小鼠桑椹胚后多能性基因Oct-4mRNA表达的变化并未影响其体外发育潜力。