鸡胚胎干细胞无饲养层培养体系的建立及其转染体系的优化

作者: 郑蒙蒙 [1] ; 李伟 [1] ; 张亚妮 [1] ; 施青青 [1] ; 王丹 [1] ; 李碧春 [1]

关键词: 胚胎干细胞无饲养层培养体系脂质体优化转染鸡

摘要：鸡胚胎干细胞（cES）以其全能性，在研究胚胎发育生物学和家禽育种等方面有巨大的应用前景。本实验旨在建立cES无饲养层培养体系和对LipofactiminTM LTX（脂质体）介导转染体系进行优化。采用药匙法从新鲜受精蛋中分离获取cES，接种于层粘连蛋白包被的培养皿．待形成大克隆后．用口吸管剥离法吸取cES克隆进行消化传代，并采用生化和免疫学方法鉴定其干细胞活性。设计质粒量800、900、1000ng3个水平，质粒、脂质体比为1：1．5、1：2、1：2．5体系转染cES。结果表明：无饲养层培养体系体外培养cES细胞能稳定传代至第6代，鉴定结果显示碱性磷酸酶阳性和阶段特异性胚胎抗原1阳性，指明克隆能保持未分化状态；质粒900ng、质脂比为1：2时，可获得最佳转染效率72％，为cES的脂质体介导外源基因的转染提供参考。

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鸡胚胎干细胞无饲养层培养体系的建立及其转染体系的优化

作者: 郑蒙蒙 [1] ; 李伟 [1] ; 张亚妮 [1] ; 施青青 [1] ; 王丹 [1] ; 李碧春 [1]

关键词: 胚胎干细胞 无饲养层培养体系 脂质体 优化转染 鸡

关键词: 胚胎干细胞无饲养层培养体系脂质体优化转染鸡