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DNA甲基化抑制因子5-AzaDc对犬卵母细胞体外培养核成熟的影响
作者: 李所 李啸晨 康锦丹 朱海瑛 郭庆 郑鑫 尹熙俊 吉林农业大学动物科学技术学院 吉林长春130118 延边大学动物科学系 吉林延吉133002
关键词: 犬卵母细胞 体外成熟 5-氮-2-脱氧胞苷 DNA甲基化抑制
摘要：本实验旨在研究DNA甲基化酶抑制剂5-氮-2-脱氧胞苷（5-Aza Dc）对犬卵母细胞体外成熟的影响。研究比较添加不同浓度5-Aza Dc（1、2μmol/L）处理不同时间（1、2、48、72 h）观察的犬卵母细胞成熟情况,并通过DNA甲基化的免疫荧光染色,观察5-Aza Dc对DNA甲基化在犬卵母细胞中的分布情况及趋势变化。结果表明：添加2μmol/L的5-Aza Dc处理48 h,所有卵母细胞均脱离GV期,并且与对照组相比显著提高进入GVBD-MⅡ期的比率（28.3%vs.87.1%）;免疫荧光染色结果显示,成熟卵母细胞的DNA甲基化染色位点主要集中在细胞核内,并未在细胞质中出现,DNA甲基化程度显著降低,并使染色质凝集。综上所述,添加2μmol/L的5-Aza Dc处理48 h可以通过抑制DNA甲基化水平提高犬卵母细胞体外成熟率,短时间的抑制DNA甲基化水平对犬卵母细胞的减数分裂恢复有积极促进作用。