猪ZBED6基因有效突变位点的筛选与验证

作者: 张冬杰 [1] 汪亮 [2] 李忠秋 [2] 刘娣 [2]

关键词: 猪 ZBED6基因荧光信号 CRISPR-Cas9技术

摘要：锌指蛋白ZBED6基因的突变可促进骨骼肌中胰岛素样生长因子2(IGF2)转录水平显著上调,从而促进细胞增殖和肌管形成.本研究利用CRISPR.-Cas9技术对猪的ZBED6基因进行编辑,利用在线软件筛选出4个突变靶点,利用pCas9/gRNA载体构建pCas9/gRNA-ZBED6质粒,再构建4个用于验证突变效率的pTYNE-ZBED6质粒,同时转染HEK293细胞系,通过观察荧光信号的强弱判断靶序列突变效率的高低.结果表明:位于编码区第17～37位点的靶点1转染后荧光信号最强,切割效率最高,该位点是利用CRISPR-Cas9技术编辑ZBED6基因的有效位点.

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猪ZBED6基因有效突变位点的筛选与验证

作者: 张冬杰 [1] 汪亮 [2] 李忠秋 [2] 刘娣 [2]

关键词: 猪 ZBED6基因 荧光信号 CRISPR-Cas9技术

关键词: 猪 ZBED6基因荧光信号 CRISPR-Cas9技术