奶山羊催乳素受体基因CDS区的克隆和序负分析与腺病毒干扰载体的构建

作者: 赵旺生 ; 罗军 ; 邱思源 ; 王紫骞

关键词: 催乳素受体克隆腺病毒 shRNA 奶山羊

摘要：本文旨在克隆奶山羊催乳素受体（PrlR）基因CDS序列，在此基础上构建针对奶山羊PrlR的腺病毒干扰载体，为研究PrlR在奶山羊乳腺乳脂合成代谢中的功能与调控作用提供有效的RNA干扰工具。首先从西农萨能羊乳腺组织RNA中扩增得到完整CDS区序列，其CDS长为1746bp，包含581个氨基酸序列，GenBank登录号为JF966783；测序后进行序列分析和功能预测，奶山羊PrlR基因CDS区与其他反刍动物相应序列具有较高的同源性，其跨膜区为第236-258位氨基酸；然后根据测序得到的CDS序列，在线设计合成奶山羊PrlR的shRNA序列并成功构建重组干扰腺病毒载体；将这些载体在293细胞系中进行包装和扩繁，最终获取高滴度的腺毒，使用TCID50法检测病毒滴度为5．19×10^8PFU／mL。

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奶山羊催乳素受体基因CDS区的克隆和序负分析与腺病毒干扰载体的构建

作者: 赵旺生 ; 罗军 ; 邱思源 ; 王紫骞

关键词: 催乳素受体 克隆 腺病毒 shRNA 奶山羊

关键词: 催乳素受体克隆腺病毒 shRNA 奶山羊