表达绿色荧光蛋白猪源植物乳杆菌重组菌株的构建

摘要：为了深入研究益生菌猪源植物乳杆菌的作用机理，构建含有标记基团绿色荧光蛋白的植物乳杆菌重组菌株．以达到良好区分动物内外源菌的目的。以具有红霉素耐药性（Em）和氨苄青霉素耐药性（AmpR）双筛选压力的大肠杆菌——乳酸杆菌穿梭表达载体pLEM415为基本骨架，将绿色荧光蛋白（GFP）及其表达原件乳酸脱氢酶启动子（P1dhL）和嗜酸乳杆菌表面蛋白终止子（TslpA）插入该载体，构建GFP标记的穿梭表达载体pLEM415-GFP。利用电转化的方法将穿梭表达载体pLEM415-GFP转化入植物乳杆菌，获得重组植物乳相菌。结果表明：重组菌在蓝光激发下可见明显绿色荧光，连续传递10代仍可见明显荧光。结果显示，已成功构建表达G即基因的重组植物乳杆菌．为益生菌在动物体内分布和定植规律的研究奠定了基础。