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犊牛精原干细胞的分离纯化与鉴定
作者: 张卫艺 ; 洪洁赟 ; 吕妍 ; 扶晓波 ; 郭秋平 ; 赵军 ; 胡建宏
关键词: 犊牛SSCs 分离纯化 培养 鉴定
摘要:本研究旨在建立较为成熟的犊牛SSCs体外培养体系,为后续以SSCs为实验材料的相关研究奠定基础。如何富集得到大量高纯度的SSCs是研究中要解决的首要问题,也是建立SSCs体外诱导分化培养体系和SSCs后续研究的基础保障。通过借鉴较为成熟的小鼠SSCs培养体系,采用反复多次的差异贴壁法对精原细胞进行纯化,并且创新地将DMEM-高糖和DMEM-F12结合使用,有效地将支持细胞和SSCs分离并获得支持细胞饲养层细胞;再结合碱性磷酸酶(AKP)显色反应和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术对培养获得的目的细胞进行鉴定,综合2种鉴定结果表明,培养获得的细胞即为目的细胞SSCs。